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泰国试管婴儿:荧光原位杂交技术(FISH)

作 者:kevin     关注:257     发表时间:2017-07-04 18:57:52

FISH(Fluorescence In-Situ Hybridization)技术问世于20世纪70年代后期,是在原来的同位素原位杂交技术基础上发展起来的。其基本原理是,按照两个核酸的碱基序列互补原则,用特殊修饰的核苷酸分子标记DNA探针,然后将标记的探针直接原位杂交到染色体或DNA 纤维切片上,再与荧光素分子偶联的单克隆抗体和探针分子特异性结合,经荧光检测系统和图形分析技术对染色体或DNA纤维

  FISH(Fluorescence In-Situ Hybridization)荧光原位杂交技术问世于20世纪70年代后期,是在原来的同位素原位杂交技术基础上发展起来的。其基本原理是,按照两个核酸的碱基序列互补原则,用特殊修饰的核苷酸分子标记DNA探针,然后将标记的探针直接原位杂交到染色体或DNA 纤维切片上,再与荧光素分子偶联的单克隆抗体和探针分子特异性结合,经荧光检测系统和图形分析技术对染色体或DNA纤维上的DNA序列定位、定性和相对定量。

荧光原位杂交技术

  通过荧光标记的核酸探针与待测样本核酸进行原位杂交。通过在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数来对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析,从而达到对染色体或基因异常的细胞和组织样本进行检查和诊断的目的。荧光原位杂交技术为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。泰国通常使用5种不同颜色的探针来检测X染色体、Y染色体、第13、18、21对染色体。


   荧光原位杂交技术 (In situ hybridization,ISH)是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,将有放射性或非放射性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。


  荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization, FISH)则是在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记的原位杂交方法,是利用荧光标记的DNA探针来检测在细胞、组织和肿瘤的特定DNA序列的强大分子诊断技术。首先将样本DNA变性,加入特定的荧光标记的探针与变性的样本混合进行杂交,退火得到双链DNA。探针信号能够被荧光显微镜捕获,从而定性、定量地检测目标DNA。与其它用于研究染色体的技术不同,FISH操作灵活,不需要在正在分裂的细胞进行检测,因而能够用来检测或确认基因或染色体是否异常,通常用于遗传咨询,医学和品种鉴定、DNA特定功能研究。利用FISH方法还可检测非整倍体,微缺失综合征以及基因重排等,这些指标对很多遗传性疾病,如白血病,淋巴瘤,实体瘤,自闭症等发育综合征有重要的临床意义。


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